Progesterone system Прогестерон




Скачать 261.63 Kb.
Дата12.07.2016
Размер261.63 Kb.
ADALTIS

Eclectica PROGESTERONE System

Прогестерон

Кат.№ 1702700 Количество тестов: 100


Производитель:

Adaltis S.r.l.

Via Durini, 27

20122 Milano (Italy)

Tel. +39-0774-5791

Fax +39-0774-353085



www.adaltis.net
Производитель

Медицинское оборудование для

диагностики in vitro.

(применение для диагностики in

vitro)

Номер лота

Каталожный номер

Срок годности (использовать до)

Ограничение по

температуре (хранить при 2-

8ºС/2-25ºС)

Не замораживать

Количество тестов

Обратитесь к инструкции по

применению



Биологическая опасность

Опасный

Избегать воздействия прямых

солнечных лучей



Eclectica Progesterone реагент

Eclectica Progesterone

конъюгат


Eclectica Progesterone

Контроль 1



Eclectica Progesterone

Контроль 2



Промывающий раствор для

иммунохимии Eclectica



Системный промывающий

раствор Eclectica



Eclectica Субстрат

Eclectica Разделительный реагент

Eclectica Стоп-раствор

Eclectica Калибратор А

Eclectica Калибратор В

Eclectica Калибратор С

Eclectica Калибратор D

Eclectica Калибратор Е

Eclectica Калибратор F

1. Назначение

Тест-система Eclectica Progesterone Reagent Kit разработана для количественного определения Прогестерона в человеческой сыворотке и гепаринизированной плазме на анализаторе Eclectica.


Данный метод может применяться для измерения концентраций Прогестерона в диапазоне от 0,2 до 40 нг/мл (0,64 – 128 нмоль/л).

2. Справка


Прогестерон является первым биологически активным соединением в схеме биосинтеза стероидов, образуемых в коре надпочечников, в яичках у мужчин, и в яичниках и комплексе плод-плацента у женщин (1). Основной метаболит прогестерона – прегнандиол-3-глюкуронид (2). Лютеинизирующий гормон (ЛГ) регулирует синтез и секрецию прогестерона из желтого тела. Вслед за резким подъёмом ЛГ в середине менструального цикла, начинается развитие желтого тела с увеличением уровней прогестерона (3). Максимальные уровни достигаются на 5-8 день после овуляции, уменьшаясь до уровней фолликулярной фазы перед менструацией, если не происходит имплантация зародыша. Если же имплантация произошла, уровни прогестерона остаются повышенными и прогрессивно возрастают с развитием беременности (1).

Приблизительно 1% от общего количества прогестерона, циркулирующего в крови, не связано с белками. Дополнительный 1% прогестерона связан с аминоглобулином. Приблизительно 48% прогестерона связано с альбумином с более высоким сродством (ka = 1 x 104 l/mol), чем у других стероидных гормонов. Оставшиеся 48% связаны с кортизол-связывающим глобулином с высоким сродством (ka = 1 x 103 l/mol) (4).

Основная роль прогестерона заключается в подготовке матки к имплантации, и в ранней поддержке беременности. Он также действует вместе с пролактином в подготовке моложных желез к лактации (5). Клинические измерения прогестерона применяются для мониторинга функции яичников, подтверждения овуляции, оценки недостаточности лютеиновой фазы, и контроля эффективности процедур по индукции овуляции (6, 7, 8).

Предложено использовать измерения объединенного лютеинового прогестерона в качестве точной оценки лютеиновой функции в дополнение к , или вместо, биопсии эндометрия (9). Уровни прогестерона повышаются как при нормальной, так и при внематочной беременности (10, 11, 12, 13, 14). Измерения сывороточного прогестерона также применяли для мониторинга заместительной терапии (15), и для оценки пациентов с риском спонтанного выкидыша на ранней стадии беременности (11, 15, 16).


3. Принцип метода


Для тестирования прогестерона на анализаторе Eclectica необходимы:

  1. Тест-система для определения Прогестерона Eclectica: специфические реагенты тест-системы Eclectica Progesterone Reagent Kit для выполнения тестирования и проверки калибровки.

  2. Тест-система для калибровки Прогестерона Eclectica: для стандартизации.

  3. Тест-система общих реагентов для иммунохимии Eclectica: для реакции общей химии.

  4. Промывающий раствор для иммунохимии Eclectica: специфический промывающий раствор для иммунохимии.

  5. Системный промывающий раствор Eclectica для анализатора Eclectica.

В методике анализа Eclectica Progesterone используются мышиные моноклональные антитела к Прогестерону в системе иммуноферментного анализа, который включает стадию магнитного твердофазного разделения. Все времена инкубации и объёмы реагентов определяются специфическим протоколом программного обеспечения.

Определенные количества флуоресцеин-конъюгированных моноклональных антител к Прогестерону и конъюгата Прогестерона, конъюгированного со щелочной фосфатазой, добавляются к образцу, контролю, или стандарту. Реакционная смесь инкубируется при 37ºС.

В процессе инкубации Прогестерон в образце, контроле или калибраторах, конкурирует с конъюгатом за связывание с антителами к Прогестерону.

В конце инкубационного периода анти-флуоресцеин, связанный с магнитными частицами, добавляется в избытке. Он быстро и специфично связывается с комплексом Прогестерон - моноклональные антитела и осаждается в магнитном поле. После удаления жидкой фазы и промывки твердой фазы, раствор ферментного субстрата, фенолфталеин-монофосфат, добавляется в инкубационную ячейку, и каждая ячейка инкубируется при 37ºС. После инкубации, ферментная реакция останавливается добавлением стоп-раствора, а интенсивность окраски измеряется фотометрически. Интенсивность окраски обратно пропорциональна, в рамках рабочего диапазона теста, концентрации Прогестерона в образце. Концентрация Прогестерона в образце пациента или контроле затем определяется методом интерполяции по сохраненной стандартной кривой.


4. Реагенты – подготовка и хранение


4.1 Тест-система Eclectica Progesterone Reagent Kit Код 1702700

Не использовать компоненты тест-системы после окончания срока годности.

Тест-система Eclectica Progesterone Reagent Kit содержит специфические реагенты для выполнения 100 тестов и контроли для 5 проверок калибровки из каждого флакона.

Реагенты хранить при температуре 2-8ºС до конца срока годности, указанного на этикетке.

Информация о номере лота, сроке годности и количестве тестов содержится на параметрической карте, которая входит в состав тест-системы Eclectica Progesterone Reagent Kit. Используйте считыватель параметрических карт для загрузки информации, содержащейся на карте в систему. Для получения дополнительной информации смотрите Руководство пользователя для анализатора Eclectica.



  • 2 флакона Eclectica Progesterone Реагент Код 1702716

2 флакона, содержащие меченые флуоресцеином антитела к Прогестерону и вытесняющий агент в Трис буфере с хлоридами натрия, магния и цинка, бычьим сывороточным альбумином, овечьей сывороткой и азидом натрия (< 0,1% w/w). Реагент готов к применению и один флакон рассчитан на 50 тестов. Хранить реагент при температуре 2-8ºС до конца срока годности, указанного на этикетке. Защищать от воздействия прямых солнечных лучей.

Вскрытый реагент стабилен в течение:

- 2 месяцев при хранении в закрытом флаконе при 2-8ºС;

- 2 недель при хранении в закрытом флаконе в анализаторе Eclectica с включенным охлаждением.

После использования закройте каждый флакон своей специфической крышкой.

Смотрите раздел 7. Паспорт безопасности предоставляется по запросу.



  • 2 флакона Eclectica Progesterone Конъюгат Код 1702715

2 флакона, содержащие Прогестерон, меченный бычьей щелочной фосфатазой, в Трис буфере с хлоридами натрия, магния и цинка, бычьим сывороточным альбумином, овечьей сывороткой и азидом натрия (< 0,1% w/w). Реагент готов к применению и один флакон рассчитан на 50 тестов.

Хранить реагент при температуре 2-8ºС до конца срока годности, указанного на этикетке. Защищать от воздействия прямых солнечных лучей.

Вскрытый реагент стабилен в течение:

- 2 месяцев при хранении в закрытом флаконе при 2-8ºС;

- 2 недель при хранении в закрытом флаконе в анализаторе Eclectica с включенным охлаждением.

После использования закройте каждый флакон своей специфической крышкой.

Смотрите раздел 7.

Паспорт безопасности предоставляется по запросу.



  • 2 флакона Eclectica Progesterone Контроль 1 Код 1702718

2 флакона, содержащие около 1 нг/мл (3,2 нмоль/л) Прогестерона в человеческой сыворотке с азидом натрия (< 0,1% w/w). Флакон содержит 1 мл готового к применению контроля.

Хранить контроль при температуре 2-8ºС до конца срока годности, указанного на этикетке. В конце тестирования убрать флакон и хранить его закрытым при 2-8ºС, если контроль не используется в последующие 24 часа или в тот же день.

Вскрытый контроль стабилен в течение:

- 2 месяцев при хранении в закрытом флаконе при 2-8ºС,

- 1 недели при хранении в закрытом флаконе в анализаторе Eclectica с включенным охлаждением.

После использования закройте каждый флакон своей специфической крышкой.

Смотрите раздел 7. Информацию о безопасном обращении с реагентом смотрите в паспорте безопасности.

Внимание: реагент относится к классу опасности Xn: R 22, S 23 36 60.



Коды риска:

R 22 опасен при проглатывании.

Коды безопасности:

S 23 не вдыхать аэрозоль.

S 36 надевайте защитную спецодежду.

S 60 данный материал и его флакон следует

утилизировать как опасные отходы.



  • 2 флакона Eclectica Progesterone Контроль 2 Код 1702719

2 флакона, содержащие около 20 нг/мл (63,6 нмоль/л) Прогестерона в человеческой сыворотке с азидом натрия (< 0,1% w/w). Флакон содержит 1 мл готового к применению контроля.

Хранить контроль при температуре 2-8ºС до конца срока годности, указанного на этикетке. В конце тестирования убрать флакон и хранить его закрытым при 2-8ºС, если контроль не используется в последующие 24 часа или в тот же день.

Вскрытый контроль стабилен в течение:

- 2 месяцев при хранении в закрытом флаконе при 2-8ºС,

- 1 недели при хранении в закрытом флаконе в анализаторе Eclectica с включенным охлаждением.

После использования закройте каждый флакон своей специфической крышкой.

Смотрите раздел 7. Информацию о безопасном обращении с реагентом смотрите в паспорте безопасности.

Внимание: реагент относится к классу опасности Xn: R 22, S 23 36 60.



Коды риска:

R 22 опасен при проглатывании.

Коды безопасности:

S 23 не вдыхать аэрозоль.

S 36 надевайте защитную спецодежду.

S 60 данный материал и его флакон следует

утилизировать как опасные отходы.


5. Необходимые реагенты, поставляемые отдельно


5.1 Тест-система для калибровки Eclectica Progesterone Calibration Kit Код 1702717

Тест-система для калибровки Eclectica Progesterone Calibration Kit содержит шесть флаконов. Калибраторы прогестерона помечены от А до F и содержат приблизительно 0- 1- 5- 10- 20- 40 нг Прогестерона на мл (0, 3,2, 16, 32, 64, 128 нмоль/л) в человеческой сыворотке с азидом натрия (< 0,1% w/w). Флакон содержит 1 мл готового к применению калибратора.

Точная концентрация каждого калибратора содержится на параметрической карте, которая входит в состав тест-системы для калибровки Прогестерона. Используйте считыватель параметрических карт для загрузки информации, содержащейся на карте в систему. Для получения дополнительной информации смотрите Руководство пользователя для анализатора Eclectica.

Необходимо, чтобы флаконы достигли комнатной температуры (18-25ºС) и перед применением содержимое флаконов следует осторожно перемешать.

Хранить калибраторы при температуре 2-8ºС до конца срока годности, указанного на этикетке.

В конце тестирования убрать флакон и хранить его закрытым при 2-8ºС, если калибратор не используется в последующие 24 часа или в тот же день.

Вскрытый калибратор стабилен в течение:

- 2 месяцев при хранении в закрытом флаконе при 2-8ºС,

- 1 недели при хранении в закрытом флаконе в анализаторе Eclectica с включенным охлаждением.

После использования закройте каждый флакон своей специфической крышкой.

Смотрите раздел 7. Информацию о безопасном обращении с реагентом смотрите в паспорте безопасности.

Внимание: реагент относится к классу опасности Xn: R 22, S 23 36 60.



Коды риска:

R 22 опасен при проглатывании.

Коды безопасности:

S 23 не вдыхать аэрозоль.

S 36 надевайте защитную спецодежду.

S 60 данный материал и его флакон следует

утилизировать как опасные отходы.



5.2 Тест-система общих реагентов для иммунохимии Eclectica Код 1700010

На анализаторе Eclectica используются 3 общих реагента для всех иммуноанализов.

Каждый флакон содержит достаточный объём для выполнения 200 тестов при использования анализатора в стандартных условиях (2 еженедельных запуска и 10 ежедневных запусков).

Хранить при температуре 2-8ºС до конца срока годности, указанного на этикетке.

Необходимо, чтобы компоненты тест-системы общих реагентов для иммунохимии достигли комнатной температуры (18-25ºС) перед установкой на борт анализатора. Вскрытые общие реагенты стабильны в течение двух недель (при хранении при 2-8ºС или на борту анализатора Eclectica).

Информация о номере лота, сроке годности и количество тестов для каждого общего реагента содержится на параметрической карте, которая входит в состав тест-системы общих реагентов для иммунохимии. Используйте считыватель параметрических карт для загрузки информации, содержащейся на карте в систему. Для получения дополнительной информации смотрите Руководство пользователя для анализатора Eclectica.



  • 1 флакон Eclectica Разделительный реагент Код 1700004

Реагент содержит овечью анти-флуоресцеиновую сыворотку, связанную с магнитными частицами (0,6% w/v), и белок бычьей сыворотки в буфере с консервантами, включая азид натрия (<0,1% w/w). Реагент готов к применению. Перед тестированием перемешать тщательно, но аккуратно, чтобы получилась равномерная суспензия магнитных частиц. Не использовать магнитную мешалку. Хранить при температуре 2-8ºС до конца срока годности, указанного на этикетке. Вскрытый Реагент стабилен в течение двух недель (при хранении при 2-8ºС или на борту анализатора Eclectica).

Не замораживать. Смотрите раздел 7.

  • 1 флакон Eclectica Субстрат Код 1700002

Содержит фенолфталеин-монофосфат в качестве ферментного кофактора и консервант в буферном растворе. Содержит 2,2’-иминодиэтанол (> 10%). Реагент готов к применению. Хранить при температуре 2-8ºС до конца срока годности, указанного на этикетке. Избегать воздействия прямых солнечных лучей.

Вскрытый Реагент стабилен в течение двух недель (при хранении при 2-8ºС или на борту анализатора Eclectica).

Смотрите раздел 7. Информацию о безопасном обращении с реагентом смотрите в паспорте безопасности.

Внимание: реагент относится к классу опасности Xn: R 41 48/22, S 3 26 36/37/39 60.



Коды риска:

R 41 риск серьезного поврежде-

ния глаз.



R 48/22 опасный: опасно для

здоровья при длительном контакте и проглатывании.



Коды безопасности:

S 3 хранить в холодном месте.

S 26 в случае попадания в глаза,

сразу промыть проточной водой и обратиться за медицинской помощью.



S 36/37/39 надевать спецодежду,

перчатки и защитные очки.



S 60 данный материал и его контейнер

следует утилизировать как опасные отходы.



  • 1 флакон Eclectica Стоп-раствор Код 1700003

Содержит хелатирующий агент и гидрооксид натрия (< 1% w/w) в буфере, рН >10. Реагент готов к применению. Хранить при температуре 2-25ºС до конца срока годности, указанного на этикетке. Вскрытый Реагент стабилен в течение двух недель (при хранении при 2-8ºС или на борту анализатора Eclectica).

Внимание: реагент относится к классу опасности Xi: R 36/38, S 23 26 37 60.

Смотрите раздел 7. Информацию о безопасном обращении с реагентом смотрите в паспорте безопасности.

Коды риска:

R 36/38 раздражает глаза и кожу.

Коды безопасности:

S 23 не вдыхать аэрозоль.

S 26 в случае попадания в глаза, сразу

промыть проточной водой и обратиться за медицинской помощью.



S 37 надевать защитные перчатки.

S 60 данный материал и его флакон

следует утилизировать как опасные отходы.



5.3 Промывающий раствор для иммунохимии Eclectica Код 1700001Р4

Один флакон содержит 900 мл Трис буфера (> 1%) и консервант.

Раствор готов к применению. Хранить при температуре 2-25ºС до конца срока годности, указанного на этикетке. Вскрытый раствор стабилен в течение двух недель (при хранении при 2-8ºС или на борту анализатора Eclectica).

Смотрите раздел 7. Паспорт безопасности предоставляется по запросу.



5.4 Системный промывающий раствор Eclectica Код 1750102Р4

Один флакон содержит 1600 мл готового к применению карбонатного буфера и антибактериальный консервант. Хранить при температуре 2-25ºС до срока годности, указанного на этикетке.

После вскрытия раствор стабилен в течение двух недель (при хранении при 2-25ºС или на борту анализатора Eclectica).

Смотрите раздел 7. Паспорт безопасности предоставляется по запросу.



6. Необходимые материалы и оборудование

6.1 Предоставленные Реагенты для тестирования

Тест-система для определения Eclectica Progesterone Reagent Kit.

Тест-система для калибровки Eclectica Progesterone Calibration Kit.

Тест-система общих реагентов для иммунохимии Eclectica.

Промывающий раствор для иммунохимии Eclectica.

Системный промывающий раствор Eclectica.

Комплект растворов для промывки анализатора Eclectica (код 1700006 – информацию о составе и применении читайте в Руководстве пользователя для анализатора Eclectica).

6.2 Необходимое Оборудование/ принадлежности, поставляемые отдельно

Анализатор иммунохимический Eclectica.

Одноразовые блоки кювет.

Пробирки кат. № 18056 (дополнительную информацию читайте в Руководстве пользователя для анализатора Eclectica).



7. Меры предосторожности и ограничения

Для in vitro диагностики.

Только квалифицированный лабораторный персонал должен использовать данный тест и проведение процедуры тестирования должно быть в соответствии со стандартом GLP (правила лабораторной практики).

Запрещается смешивать реагенты из разных лотов.

Все реагенты следует использовать на анализаторах, которые находятся в хорошем рабочем состоянии и тщательно очищены с помощью Eclectica комплекта растворов для промывки (код 1700006).

Дополнительную информацию об обслуживании и инструкциях по применению читайте в Руководстве пользователя для анализатора Eclectica.



7.1 Меры безопасности

1. Не пипетировать реагенты ртом.



2. Не курить, не есть, и не использовать косметику в помещениях, где обрабатываются образцы пациентов или реагенты тест-систем.

3. Кожу порезов и других повреждений следует тщательно защищать соответствующей водостойкой повязкой.

4. Следует избегать самозаражения, попадания брызг на слизистые оболочки, или образования аэрозолей.

5. Следует надевать лабораторные перчатки при обработке образцов пациентов или удалении твердых или жидких отходов.

7.2 Предупреждение о потенциальной биологической опасности

Некоторые реагенты системы Eclectica содержат материал животного происхождения, даже если указано, что он получен от здоровых животных, рекомендуется обращаться с реагентами, следуя тем же мерам предосторожности, что и в работе с потенциально инфекционными образцами.

Некоторые реагенты, используемые в системе Eclectica, могут быть получены из пула сывороток крови человека. Каждая порция крови, использованная для создания пула сывороток, была проверена утвержденными методами FDA (Управление по контролю качества продуктов питания и лекарственных средств) на отсутствие сифилиса, поверхностного антигена вируса гепатита B (HBsAG), вируса гепатита C (HCV) и антител против ВИЧ (HIV 1 + 2). Поскольку, никакой тест не может давать полной гарантии отсутствия вируса гепатита B, ВИЧ и другие инфекционных агентов, то указанные реагенты следует рассматривать как потенциально опасные и обращаться с ними, следуя тем же мерам предосторожности, что и при работе с образцами сыворотки или плазмы. Некоторые реагенты, такие как калибраторы и контроли, могут содержать материал тканей человеческого происхождения. В настоящее время, отсутствует стандартный тест на наличие ВИЧ в таком материале. Поэтому рекомендуется и такие реагенты рассматривать как потенциально опасные.

С такими материалами следует обращаться в соответствии с правилами лабораторной практики, как описано в документе CDC (Центр по контролю заболеваемости, Атланта, США): Универсальные меры предосторожности для предотвращения передачи вируса иммунодефицита человека, вируса гепатита B и других передающихся через кровь патогенов в учреждениях здравоохранения «MMWR» 37:377-387, 1999.



7.3 Опасные химические вещества - Предупреждение

Некоторые реагенты относятся к опасным химическим веществам, согласно классификатору. Для безопасной работы рекомендуется внимательно прочитать информацию в Паспорте безопасности.



7.4 Ограничения

Не использовать ЭДТА и цитрат натрия в качестве антикоагулянта, поскольку они ингибируют ферментативную реакцию. Помутнение, агрегация и выпадение осадка в любом из Eclectica реагентов указывает на возможное ухудшение их качества. Обратитесь за консультацией к вашему региональному дистрибьютору. Как и во всех анализах, на результаты данного теста могут повлиять факторы, присутствующие в образцах некоторых пациентов.

Как в любом иммуноанализе, на результаты могут повлиять факторы, присутствующие в сыворотке пациента. Реагенты для данного теста изготовлены таким образом, чтобы минимизировать помехи гетерофильных антител и неспецифического связывания белка. Однако результаты индивидуальных образцов могут подвергаться влиянию.

Для диагностических целей, результат, полученный при данном тестировании всегда должен использоваться совместно с клинической картиной, анамнезом пациента и другими лабораторными исследованиями.

Применение реагентов, расходных материалов, и запасных частей, отличающихся от поставляемых уполномоченным дистрибьютором, может привести к неправильным результатам.

Реагенты различных лотов нельзя смешивать вместе.



8. Отбор образца и хранение

Следующие рекомендации для обработки и хранения образцов крови выпущены Национальным комитетом по клиническим лабораторным стандартам (NCCLS – Doc. H18-A):

- Забор образцов крови проводить с соблюдением стандартных мер предосторожностей при отборе биологических жидкостей.

- В случае образцов сыворотки, обеспечить полную коагуляцию образцов перед центрифугированием:



Примечание: Центрифугирование образцов сыворотки до окончания коагуляции может привести к появлению фибрина. Чтобы избежать неверных результатов из-за присутствия фибрина, следует убедиться в том, что процесс коагуляции полностью завершен перед центрифугированием образцов. Некоторые образцы, в частности образцы пациентов, получающих терапию антикоагулянтами, могут потребовать более длительного времени для коагуляции.

- Пробирки следует хранить закрытыми в вертикальном положении.

- Не использовать образцы, которые находились при комнатной температуре более 8 часов

- Герметически запечатать и охладить образцы (2-8ºС), если раскапывание не выполнено в течение 8 часов.

- Заморозить образцы при температуре -20ºС или ниже, если тестирование не выполнено в течение 48 часов.

- Замораживать образцы только один раз, после размораживания, их следует тщательно перемешать.

Для осветления липемических образцов рекомендуется применение ультрацентрифуги. Гемолизированные образцы могут указывать на несоответствующую обработку образца перед доставкой его в лабораторию; по этой причине, результаты следует интерпретировать с осторожностью.

Требуемый объём: составляет 0,05 мл образца для каждого определения. Этот объём не включает в себя мертвый объём (неиспользуемый объём в пробирке с образцом) или дополнительный объём, требуемый для повторов или для выполнения других тестов для того же самого образца. Дополнительную информацию по определению минимального требуемого объёма читайте в разделе «Требования к объёму образца» в Руководстве пользователя для анализатора Eclectica.

Перед помещением образца на борт анализатора следует проверить образцы на отсутствие в них фибрина, частиц, и пузырьков воздуха.



8.1 Сыворотка

Внести 5 мл венозной крови в стеклянную или пластиковую пробирку без добавок. Позволить крови свернуться при комнатной температуре (18-25ºС). Отцентрифугировать, и отделить сывороточную фракцию.



8.2 Плазма

Внести 5 мл венозной крови в стеклянную или пластиковую пробирку, содержащую гепарин в качестве антикоагулянта. Отцентрифугировать, и отделить плазменную фракцию.



Не использовать ЭДТА- или цитратную плазму.

9. Процедура анализа

Руководство пользователя для анализатора Eclectica подробно описывает процедуру подготовки, установки, стандартизации, тестирования и контроля качества. Следует выполнять все стандартные процедуры обслуживания, как описано в Руководстве пользователя для получения оптимальных результатов анализа.



  • Тест-система для определения аналита, которая включает также контроли 1 и 2, идентифицируется по номеру лота, специфичного для данного реагента.

  • Каждый лот тест-систем можно загрузить только с помощью соответствующей параметрической карточки, входящей в состав реагентов.

  • Нельзя смешивать реагенты разных лотов.

  • Калибровка метода специфична для конкретного лота реагентов.

  • Для каждого нового лота реагентов определяется основная калибровочная кривая (референсная кривая), которую получают при выполнении серии тестов на различных анализаторах.

  • Данные контролей (в единицах OD и концентрации), рассчитанные по референсной кривой, хранятся на параметрической карточке, поставляемой в упаковке тест-системы, и эти данные представляют «целевые» значения.

  • Данные закодированного лота загружаются в анализатор Eclectica при считывании информации с параметрической карточки.

  • Данные контролей 1 и 2, в единицах сигнала, полученные экспериментально, сравниваются с соответствующим «ожидаемым сигналом».

  • Достоверность калибровочной таблицы оценивается в отношении группы параметров качества и, в случае, когда результаты принимаются, таблица будет загружена в память, связанную с лотом реагентов.

9.1 Рекомендуемый интервал уточнения кривой: 2 недели.

Примечание: Проверка калибровки (посредством Контроля 1 и Контроля 2) необходима по истечении 2 недель, при загрузке нового лота специфических реагентов или тест-системы общего назначения, при замене некоторых компонентов системы, или когда измеренная концентрация контрольной сыворотки не соответствует спецификации.

9.2 Время первого результата: 52 минуты.

10. Контроль качества

Каждой лаборатории рекомендуется регулярно использовать материалы контроля качества и установить свои собственные контрольные диапазоны.

Необходимо проводить измерение многоуровневых контролей при каждом тестировании Эстрадиола. Значения Эстрадиола, полученные для контрольных материалов, не должны часто выходить за границы контрольных диапазонов, установленных в каждой лаборатории. Если эти контрольные значения регулярно попадают за границы установленных контрольных диапазонов, то следует проверить правильность работы прибора (смотрите раздел «Устранение неисправностей» в Руководстве пользователя для анализатора Eclectica).

11. Расчеты и результаты

Значения образца рассчитываются программой пользователя Eclectica, используя референсную калибровочную кривую и измерение контролей, во время тестирования. Программа анализатора Eclectica подтверждает, что хранящаяся эталонная кривая соответствует специфическим критериям анализа.

В дополнение к имеющейся действительной референсной кривой, измеряемые контроли должны быть в пределах, установленных программой для результатов образцов, чтобы быть распечатанными анализатором Eclectica.

12. Ожидаемые значения

Заявленные ожидаемые результаты по Прогестерону были ранее определены с использованием SR1 Progesterone. Результаты были подтверждены применением тест-системы Eclectica Progesterone при анализе 61образца.



12.1 Здоровые пациенты

Каждая лаборатория должна определить свои собственные рефернсные диапазоны, применимые к её местному населению и методикам обследования пациентов.

В качестве ориентировочных, с использованием SR1 Progesterone тест были определены диапазоныпо Прогестерону, указанные ниже. Диапазоны были рассчитаны при использовании данных по образцам сыворотки от нормально менструирующих женщин. Полученные значения медианы и контрольные диапазоны показаны в таблице 1:

Таблица 1






Значение Прогестерона




n

Медиана, нг/мл (нмоль/л)

Диапазон, нг/мл (нмоль/л)

Здоровые мужчины*

100

0,55 (1,75)

<2,4 (<7,6)

Менструирующие женщины:










Фолликулярная фаза*

68

0,75 (2,4)

<1,82 (<5,8)

Лютеиновая фаза**

68

12,23 (38,9)

3,29-30 (10,5-95,5)

* 95 процентиль

** Диапазон рассчитан как 2,5 и 97,5 перцентили

Фолликулярная фаза: от 9 до 4 дней перед

пиком ЛГ


Лютеальная фаза: от 4 до 9 дней после

пика ЛГ


Эти значения являются только ориентировочными и могут отличаться от других опубликованных значений, как результат различий в методах и в обследованном населении. Каждой лаборатории рекомендуется установить свои собственные контрольные диапазоны.

12.2 Факторы, связанные с повышенными значениями (17)

Концентрации прогестерона в сыворотке беременных женщин повышаются, по сравнению с уровнями, определяемыми в сыворотке небеременных женщин;

концентрация прогестерона возрастает с развитием беременности по неделям (17).

12.3 Факторы, связанные с пониженными значениями (6, 18, 19, 20)

Концентрации прогестерона в сыворотке женщин с недостаточностью лютеальной фазы, или с нарушением овуляции, понижаются по сравнению с уровнями, определяемыми во время лютеальной фазы у нормально овулирующих женщин (6, 18, 19, 20).



13. Технические характеристики

13.1 Диапазон калибровки

0,2 - 40 нг/мл (0,64 – 128 нмоль/л).

Результаты теста Eclectica Progesterone выражаются в единицах нг/мл.

Коэффициент пересчета:

нг/мл х 3,2 = нмоль/л

нг/мл х 100 = нг/дл

Эти альтернативные единицы измерения можно заранее запрограммировать в Eclectica анализаторе. Дополнительную информацию читайте в Руководстве пользователя для анализатора Eclectica.

13.2 Разбавление

Пять образцов сыворотки, содержащие концентрации Прогестерона в аналитическом диапазоне (0,2 - 40 нг/мл), были разбавлены оффлайн Eclectica Progesterone до нормальных концентраций Прогестерона у мужчин (0,65 нг/мл) и измерены на анализаторе Eclectica. Средний процент воспроизводимости показан в следующей таблице:



Образец

Фактор разбавления

n

% неразбавленного значения

SD

1

T.Q.

5

N.A.

N.A.

2

1:2

5

95,4

2,58

3

1:4

5

92,2

2,83

4

1:8

5

87,5

1,38

13.3 Воспроизводимость

Воспроизводимость теста Прогестерон была определена повторяющимся анализом образцов в четырех повторах в течение 20 дней, один анализ в день, всего 20 анализов и 80 повторов, используя два анализатора. Полученные результаты показаны в следующей таблице.

Значения выражены в нг/мл.

Образец

Среднее

SD

CV, %

Внутрисерийная

1

1,52

0,14

9

2

5,32

0,32

6

3

15,86

0,87

5,5

Межсерийная

1

1,52

0,12

7,8

2

5,32

0,12

2,2

3

15,86

0,35

2,2

Общая

1

1,52

0,18

11,9

2

5,32

0,34

6,4

3

15,86

0,94

5,9

13.4 Чувствительность

Предел чувствительности теста <0,2 нг/мл, и определяется как концентрация Прогестерона, эквивалентная средней оптической плотности Калибратора А минус два стандартных отклонения, основанных на 20 повторах образца с нулевым аналитом.



13.5 Специфичность

Перекрестная реактивность теста Прогестерона была оценена измерением различимого ответа теста на разнообразные обладающие потенциальной перекрестной реактивностью аналиты:



Перекрестный реактант

Концентрация реактанта, мкг/мл

Измеренеая концентрация прогестерона

нг/мл

нмоль/л

Дезоксикортикостерон

1

15,1

48,1

Прегненолон

1

5

16

Прегненолон-3-сульфат

1

0,73

2,32

Прегненолон-3-глюкуронид

0,1

<0,2

<0,64

17α-гидроксипрогестерон

1

14,5

46

20α-гидроксипрогестерон

1

<0,2

<0,64

3β,17α-дигидроксипрогестерон

1

<0,2

<0,64

5α-прегнандион

0,1

13,8

43,7

Прегнандиол

1

<0,2

<0,64

Кортикостерон

1

5,46

17,4

Тестостерон

1

<0,2

<0,64

Эстрадиол

1

<0,2

<0,64

Эстрон

1

<0,2

<0,64

Эстриол

1

<0,2

<0,64

Андростендион

1

1,96

6,23

Кортизол

1

<0,2

<0,64

Холестерин

1

<0,2

<0,64

Прегнандиол-3-глюкуронид

1

<0,2

<0,64

DHEA

1

<0,2

<0,64

DHEA-s

1

<0,2

<0,64

Альдостерон

1

<0,2

<0,64

Даназол

5

0,44

1,4

13.5 Сравнение метода

Метод Eclectica Progesterone сравнивали с эталонным методом, используя SR1 Progesterone. Образцы сывороточного Прогестерона анализировали двумя методами.

С помощью анализа линейной регрессии получены следующие результаты:

у = 0,82 х

r2 = 0,934

x = эталонный метод SR1 Progesterone

у = Eclectica Progesterone

n = 61


14. Литература

1. Solomon, S., Formation and metabolism of neutral steroids in the human placenta and fetus, J. Clin. Endocr. Metab. 26: 762-772, 1966.

2. Fotherby, K., The biochemistry of progesterone, vitamins and hormones, 22: 153-204, 1964.

3. Lee, C. Y., Coulan, C.B., Jiang, N.S., Ryan, R.J., Receptors for human luteinising hormone in human corpora luteal tissue, J. Clin. Endocr. Metab. 36: 148-152, 1973.

4. Westphal, Steroid protein interactions, Springer-Verlag Berlin, Heidelberg, New York.

5. Porter, D.G., Finn, C.A., The biology of the uterus, in: Frontiers in reproduction and fertility control R.O. Greep and M.A. Koblinsky (Eds) MIT Press, Cambridge MA. pp 146-156, 1977.

6. Radwanska, E., Hammond, J., Smith, P., Single midluteal progesterone assay in the management of ovulatory infertility. J. Reprod. Med 26: 85-89, 1981.

7. Abraham, G.E., Maroulis, G.B., Marshall, J.R., Evaluation of ovulation and corpus luteum function using measurement of plasma progesterone, Obstet. Gynecol. 4L: 522-525, 1974.

8. Hammond, M.G., Talbert, L.M., Clomiphene citrate therapy on infertile women with low luteal phase progesterone levels, Obstet. Gynecol. 59: 275-279, 1982.

9. Wu, C.JH., Minassian, S.S., The integrated luteal proges­terone: an assessment of luteal function, Fertil. Steril. 48: 937-940, 1987.

10. Milwidsky, A., Segal, S., Menasbe, M., Adoni, A., Palti, A., Corpus luteum function in ectopic pregnancy, Int. J. Fertil. 29: 244-246, 1984.

11. Radwanskia, E., Frankenberg, J., Allen, E.I., Plasma progesterone levels in normal and abnormal early human pregnancy, Fertil. Steril. 30: 298-402, 1978.

12. Guillaume, J., Benjamin, F., Sicuranza, B., Wang, C.F., Garcia, A., Friberg, J., Maternal serum levels of estradiol, proges­terone and human chorionic gonadotropin in ectopic pregnancy and their correlation with endometrial histologic findings, Surg. Gynecol. Obstet. 165: 9-12, 1987.

13. Matthews, C.P., Coulson, P.B., Wild, R.A., Serum proges­terone levels as an aid in the diagnosis of ectopic pregnancy, Obstet. Gynecol. 68: 390-394, 1986.

14. Yeko, T.R., Gorrill, M.J., Hughes, L.H., Rodi, I.A., Buster, J.E., Sauer, M.V., Timely diagnosis of early ectopic pregnancy using a single blood progesterone measurement, Fertil. Steril. 48: 1048-1050, 1987.

15. Hensleigh, P.A., Fainstat, T., Corpus luteum dysfunction: serum progesterone levels in diagnosis and assessment of therapy for recurrent and threatened abortion. Fertil. Steril. 32: 396-399, 1979.

16. Hernández Horta, J.L., Gordillo Fernández, J., Soto de Leon, B., Cortés-Gallegos, V., Direct evidence of luteal insufficiency in women with habitual abortion, Obstet. Gynecol. 49, 6: 705-708, 1977.

17. Klopper, A. and Fuchs, F., Progestagens Endocrinology of Pregnancy. F. Fuchs and A. Klopper eds, Hagerstown: Harper & Row, 99-122, 1977.

18. Bauman, J., Basal body temperature: unreliable method of ovulation detection, Fertil. Steril. 36, 729-33, 1981.

19. Jones, J., Luteal phase defects. Progress in infertility, S.J. Behrman and R.W. Kistner, eds (Boston: Little, Brown, 2nd Edition, 299-324, 1975).

20. Sheehan, K.L., Casper, R.F. and Yen, S.S.C., Luteal phase defects induced by an agonist of luteinizing hormone-releasing factor: a model for fertility control, Science 215, 170-172, 1982.

21. Abraham, G.E., Solid phase radioimmunoassay of Estradiol-17b, Clin. Endocrinol. Metab. 29: 866-870, 1969.

22. KINDERS, R.J., HASS, G.M., Interference in immunoassay by human anti-mouse antibodies. Eur. J. Cancer. 26 (5):647, 1990.

23. BOSCATO, L.M., STUART, M.C., Incidence and specificity of interference in two-site immunoassays. Clin. Chem. 32 (8): 1491, 1986.




База данных защищена авторским правом ©uverenniy.ru 2016
обратиться к администрации

    Главная страница