Кальмодулинзависимая фосфатаза кальциневрина регулирует рост и экспрессию генов поперечно-полосатых мышц




Скачать 130.56 Kb.
Дата14.08.2016
Размер130.56 Kb.
mymio_logo.jpg

Небольшой молекулярный активатор гипертрофии сердца обнаружили при химическом скрининге для модификаторов пути кальцинейриновой сигнализации



Кальмодулинзависимая фосфатаза кальциневрина регулирует рост и экспрессию генов поперечно-полосатых мышц. Активность кальциневрина модулируется семейством кофакторов, которые называют модулирующими взаимодействие кальциневрина белками ( MCIPs ). В центре процесса ген MCIP1, который активируется кальциневрином, поэтому было предложено включить цепь отрицательной обратной связи, чтобы сдержать потенциально патологические сигналы кальциневрина, которые в противном случае могут привести к аномальному сердечному росту. При скрининге для малых молекул , способных регулировать экспрессию MCIP1 в мышечных клетках , мы определили уникальное производное 4-аминопиридина, обладающее встроенной частичной структурой серотонина (5- гидрокситриптамина , 5-НТ) . Эта молекула упоминается как пиридиновый активатор гипертрофии миоцитов и действует как селективный агонист для 5-HT2A/2B рецепторов и индуцирует гипертрофию сердечной мышцы через сигнальный путь с участием кальциневрина и киназа -зависимый механизм, который инактивирует дезацетилазу гистонов класса II, которые действуют как репрессоры сердечного роста. Эти данные идентификации MCIP1 как нижестоящий цели сигнализации рецептора 5-HT2A/2B в клетках сердечной мышцы предлагают возможное применение для 5-HT2A/2B агонистов и антагонистов , как модуляторов сердечного роста и экспрессии генов. Многочисленные агонисты , которые действуют через G -белок вызвать активацию кальций-зависимых сигнальных путей , которые стимулируют сердечный рост и экспрессию генов (см. обзор в работе . 1 ). Послеродовая возможность кардиомиоцитов реагировать на такие сигналы гипертрофического роста , характеризуется увеличением размера миоцитов и синтеза белка, сборки саркомеров и активации программы генов плода (rev. Ref. 2 ). Активации кальмодулин -зависимой фосфатазы кальциневрина достаточно и , во многих случаях , она необходима для патологической сердечной гипертрофии, основного предиктора заболеваемости и смертности людей. Таким образом, имеет огромный интерес в выявлении новых малых молекул , способных терапевтической модуляции сигналов кальциневрина в сердце. Многие кальциневрин чувствительных гены контролируются членами семейства ядерного фактора активированных Т-клеток ( NFAT ), семейства транскрипционных факторов , которые перемещается в ядро ​​, когда произошло дефосфорилирование по кальцинейриновому пути. Кальциневриновый путь также стимулирует энхансер фактор -2 ( MEF2 ) миоцитов, транскрипционный фактор нескольких механизмов (6). Мы показали, что кальцинейрин активирует киназы, которые фосфорилируют класс II дезацетилазы гистонов ( HDACs ) , которые действуют как MEF2 корепрессоры ( 7 ) . Сигнал - зависимое фосфорилирование HDACs класса II запускает их экспорт из ядра и активацию MEF2 генов-мишеней (8, 9) . HDACs мутанты, лишенные сигнальных сайтов фосфорилирования являются невосприимчивыми к кальциевой сигнализации и не имеют гипертрофию кардиомиоцитов. На деятельность кальцинейрина влияют кофакторы, известные как модуляторы кальцинейрин взаимодействующих белков ( MCIPs ) или кальцийпрессоры ( в обзоре . 10 ) . Недавние исследования на дрожжах (11) и клетках млекопитающих (12-14) показали положительные и отрицательные роли этих белков в контроле кальциневриновой активности. Избыточная экспрессия MCIP1 (также называемый синдром Дауна критической области 1) , например, подавляет кальциневриновую сигнализацию (12). В противоположность этому, MCIP1 также, кажется, усиливает кальциневриновую сигнализацию, о чем свидетельствует уменьшение деятельности кальцинейрина в сердцах мышей с MCIP1 (13). Интересно, что ген MCIP1 является мишенью NFAT и повышающей регуляции в ответ на передачу сигналов кальциневрина (15), который был предложен , чтобы создать цепь отрицательной обратной связи , которая гасит активность кальциневрина, которая в противном случае может привести к аномальному сердечному росту. В целях выявления новых малых молекул, которые могут помешать патологической гипертрофии сердца, стимулируя экспрессию MCIP1, мы провели высокой пропускной скрининг (HTS) из химической библиотеки для соединений, способных активировать кальциневрин / NFAT промотор гена MCIP1 в мышечных клетках. Мы описываем ранее неохарактеризованный 4-аминопиридин, который мы называем пиридиновый активатор гипертрофии миоцитов ( PAMH ) , который индуцирует экспрессию MCIP1 и, неожиданно, приводит к гипертрофии кардиомиоцитов. PAMH действует как 5 - гидрокситриптамин (5-НТ ) агонист на 2А/2В рецепторы и вызывает гипертрофию , по крайней мере частично , за счет стимулирования ядерного импорта NFAT и ядерного экспорта HDACs класса II. Эти данные проливают свет на мощный гипертрофический сигнальный путь от сигналов рецептора 5-HT2A/2B и предполагают, что химические модуляторы этого пути могут быть эффективны в борьбе с сердечной гипертрофией и экспрессией генов.

Материалы и методы

Культура кардиомиоцитов.

Желудочковые миоциты новорожденной крысы ( NRVMs ) культивировали , как описано ранее(16). Для получения подробных сведений см. вспомогательном текст, который публикуется в качестве вспомогательной информации на веб-сайте PNAS .

Первичные HTS .

H9c2 клетки ( American Type Culture Collection нет CRL- 1446 ; . . Ссылка 17 ) культивировали в DMEM с добавлением 10% FBS / 4 мМ L-глутамина / 1% пенициллина / стрептомицина . Клетки в концентрации 50000 клеток на мл временно трансфицировали в пакетном режиме с репортерной конструкцией (20 пг на клетку ) , кодирующей люминисцентной люциферазы под контролем промотора экзона 4 гена из человеческой MCIP1 ( пар оснований -874 до +30 относительно начиная экзона 4) и FuGENE реагента ( 6 × 10-5 мкл ) . Трансфицированные клетки высевали на 96-луночные планшеты (Packard) при плотности 5000 клеток на лунку. Библиотеку в 20000 низкомолекулярных испытуемых соединений (выбранными для молекулярного разнообразия и приобретенных у ChemBridge , Сан-Диего ) затем добавляют с помощью Biomek FX роботизированной системы подготовки проб ( Beckman Coulter ) ( одной сложной на лунку, 10 концентрация мкМ) . Шестнадцать контрольных лунок на чашку получают водный носитель ( 0,1 % ДМСО , окончательный ) . Планшеты инкубировали в течение 48 ч и обрабатывали для количественного определения активности люциферазы при помощи многоямного люминометра (Packard Fusion ) .

Вестерн-блот анализ и иммунное окрашивание .

Пептид, соответствующий С-концу мышиного белка MCIP1 (GenBank не AAF63486 ; . CRPEYTPIHLS ) синтезировали (Sigma Genosys ) с включением N -концевого остатка цистеина для облегчения конъюгации с гемоцианин лимфой улитки (KLH ). Кролики были иммунизированы KLH , конъюгированным пептидом согласно стандартным процедурам ( Lampire биологические лаборатории , Pipersville , PA) . Вестерн-блот и методы иммунологического окрашивания к β - миозин тяжелой цепи и предсердному натрийуретическому фактору (ANF) проводили, как описано в сопровождающем тексте .


Результаты

HTS для молекул, которые повышают MCIP1 экспрессию в мышечных клетках.

Основываясь на устойчивости к гипертрофии трансгенных мышей, которые сверхэкспрессируют MCIP1 в сердце (18, 19), мы стремились определить малые молекулы, способные повышению экспрессии MCIP1 в мышечных клетках, как потенциальное средство подавления патологического сердечного роста. С этой целью мы провели HTS для соединений, способных стимулировать экспрессию гена люциферазы, контролируемого альтернативного промотора экзона 4 гена MCIP1 человека в мышечных клеток линии H9c2 (рис. 1а). Это область генома содержит 15 NFAT-сайты связывания (15). Транскрипты, инициированные из экзона 4 промотора кодируют белок MCIP1 197-AA с M R ≈ 28 кДа по сравнению с ≈ 38 кДа белком, кодируемым транскриптами, содержащими экзон 1 (20).

При скрининге 20000 соединений , мы определили , что 21 стимулировало экспрессию MCIP1 - люциферазы в 2 раза или больше. Самый сильный удар, названный PAMH, показал ранее не охарактеризованный 4-аминопиридин (5,6,7,8- тетрагидро-3- метил-2- фенил [1] бензотиено [2,3- Ь] пиридин-4- амин), который имеет встроенную частичную структуру серотонина ( 5-HT ) (рис. 1В). В соответствии со своей способностью стимулировать промотор MCIP1 экзона 4 , PAMH выборочно и воспроизводимо вызывало резкое увеличение экспрессии 28 - кДа виде MCIP1 NRVMs (рис. 1в) .Чувствительность 28 - кДа MCIP1 приведена на рис . 1D . Заражение NRVMs с кодированием аденовирус активированного кальциневрина предпочтительно активирует такую ​​форму белка , кодируемого кДНК , который инициирует ATG в экзоне 4. 38- кДа MCIP. Изменчивость в отзывчивости белка 38 - кДа MCIP1 может отражать посттрансляционный эффект PAMH независимо от его влияния на кальцинеурин экзона 4 промоутера. Торможение деятельности кальцинеурина циклоспорином А (CSA) уменьшило увеличение эндогенной экспрессии MCIP1 вызванной кальцинейрином и PAMH (рис. 1 D и E ) .mymio_logo.jpg

Стимуляция гипертрофии кардиомиоцитов PAMH .

Поскольку экспрессия MCIP1 индуцируется в кардиомиоцитах разнообразными прогипертрофическими агонистами (21) , мы протестировали соединения после основного скрининга на их потенциал вызывать гипертрофию NRVMs . PAMH мощно индуцирует гипертрофию NRVMs , если судить по сборке саркомеров , размером клеток и синтеза белка (рис. 2-C ) . PAMH также активируется выражение АНФ и β - миозина тяжелой цепи , маркеров генной программы плода , а также содействовал гипертрофии так же эффективно, как фенилэфрин (PE) , мощный гипертрофический агонист, который действует через α -адренорецепторы (рис. 2 B -E) .



Образцы экспрессии генов в присутствии PAMH и ПЭ , как определено с помощью анализа микрочипов , были также удивительно похожи . Из 15866 кДНК проанализированных на микрочипе соединений, 175 были активирующими и 226 были отрицательно регулирующими ( рис. 2F) . Величина изменения в экспрессии генов и ранг отзывчивости генов к двум агонистам были также похожие у обеих агонистов (табл. 1 , которая публикуется в качестве вспомогательной информации на веб-сайте PNAS , и поддержка Text ) . MCIP1 мРНК до регулируемых ≈ 3 раза по PAMH и PE.

Сигнализация PAMH через 5-HT2A/2B рецепторы.

После наблюдения за частичным участком серотонина встроенным в структуре PAMH ( рис. 1В ) , мы сравнили эффекты PAMH и серотонина на NRVMs . Серотонин (1 мкМ) не давал наблюдаемых эффектов на рост миоцитов или выражения MCIP1. Эффект наблюдася после добавления к PAMH NRVMs , предполагая, что он действовал на поверхности клетки . Для идентификации рецепторов клеточной поверхности , которые могут опосредовать действия этих веществ, мы проверили эффекты серии агонистов и антагонистов на способность PAMH побудить ANF мРНК в NRVMs (рис. 3а) . Несмотря на схожесть между биологической активностью ПЭ и PAMH , активность PAMH не зависит от антагониста α –адренорецепторов празозина или антагониста β -адренорецепторов пропранолола . В противоположность этому, общий 5 -HT антагонист рецептора ципрогептадин и селективный 5-HT2A/2C антагонист , кетансерин , блокировали индукцию ANF и 28 кДа форму MCIP1 в ответ на PAMH (фиг. 3 А и С). АМИ- 193 и SB204741 , которые выступают в качестве 5-НТ2А и 5 - НТ2В селективных антагонистов , соответственно , у каждого было частичное тормозящее действие на PAMH, в то время как 5-HT2B/2C селективный антагонист , SB206553 , не имел никакого влияния на PAMH деятельность (рис. . 3А) . mymio_logo.jpg



Кроме того, мы протестировали рецептор- связывающие свойства PAMH путем измерения его способности конкурировать с радиоактивным диэтиламидом лизергиновой кислоты , стандартным лигандом для 5 - HT2B рецепторов в рецепторсвязывающем анализе. PAMH связан с 5 - HT2B рецептором высоким сродством , показывая K I к рецептору 64 нМ (рис. 3б) . В противоположность этому, PAMH не показал никакого заметного связывания с α -адренергическими рецепторами (данные не показаны ). Хотя PAMH связывает 5 - HT2B рецептор , SB206553 ингибирует PAMH деятельность, что предполагает, что 2А и 2B рецепторы могут играть перекрывающие роли в передаче PAMH сигналов. Эффекты каждого из указанных выше антагонистов на экспрессию ANF и MCIP1 и на гипертрофию миоцитов и сборку саркомеров в присутствии PAMH были сопоставимы (данные не показаны). Эти данные позволяют предположить, что PAMH действует через 5-НТ2А и / или 5 - НТ2В рецепторы, и что MCIP1 и гипертрофия регулируются параллельно PAMH .В целях выявления новых миметиков PAMH или антагонистов , мы сравнили деятельность ряда структурно родственных молекул. Одна из таких молекула , 2- фенил-4- хинолинамин, который мы называем антагонистом PAMH (А- PAMH , на фиг. 1b) , блокировал гипертрофию и индукцию MCIP1 в ответ на PAMH (рис. 3 D и Е ).

Анализ PAMH сигнального пути .

Чтобы исследовать путь PAMH сигнализации , мы проверили эффекты протеинкиназы и ингибиторов фосфатазы на деятельность PAMH в NRVMs . Гипертрофическая деятельность PAMH был заблокирована стауроспорином , общим ингибитором серина, треонинкиназы , и ингибитором тирозинкиназы AG556 и AG490 (рис. 4) , в то время как ингибиторы РКС ( Gö6983 , бисиндолилмалеимид ) , ПКА ( H89 , HA1004 ) , PKG ( HA1004 и ингибитор PKG ) , фосфатидилинозит -3 -киназы ( вортманнин , LY294002 ) , Раф ( ZM336372 ) , или MEK1 / 2 ( PD98059 ) незначительно или совсем не воздействовали на PAMH деятельность. Торможение кальцинейрина по ЦсА имело лишь частичное влияние на деятельность PAMH . mymio_logo.jpg



Транскрипция- ответ на PAMH.

В свете чувствительности промоутера экзона 4 MCIP1 к сигнализации кальцинейрин / NFAT (15), мы протестировали способствовал ли PAMH ядерной импорт NFAT в NRVMs. PAMH и ПЭ индуцируют транслокацию гибридного белка GFP-NFATc из цитоплазмы в ядро​​, что позволяет предположить, что они активируют кальциневриновый путь (рис. 5а).

mymio_logo.jpg

Мы также исследовали влияние PAMH по ядерной локализации HDAC5 , который , как и другие HDACs класса II , действует как подавитель гипертрофии сердца ( 7 ) . Гипертрофические сигналы приводят к фосфорилированию двух критических остатков серина в N -концевых регуляторных областях класса II HDACs , что приводит к их экспорту из ядра и дерепрессии гипертрофической программы гена ( 8 ) . Как показано на рис. 5В, слитый белок GFP- HDAC5 был локализован в ядре в стимулированных NRVMs и стал распределен диффузно по всей клеток в присутствии PAMH , предполагая, что PAMH активирует киназа -зависимый ядерный экспорт HDAC5 . ЧП также приводит ядерный экспорт GFP- HDAC5 . Экспорт был заблокирован A- PAMH ( данные не представлены) .Чтобы независимо проверить , требуется ли HDAC фосфорилирование для PAMH -опосредованной гипертрофии , мы рассмотрели могут ли устойчивые у сигналам HDAC5 мутанты , содержащие аланины вместо серина 259 и 498 , которые требуются для ядерного экспорта , блокировать активность прогипертрофических PAMH . Действительно, HDAC5 мутанты не показали рост ни в размерах клеток , ни в сборке саркомера в ответ на PAMH ( рис. 5С) . Эти данные позволяют предположить , что гипертрофия в ответ на PAMH требует активации транскрипции генов, которые подавляются HDAC5 , и что PAMH активирует киназы , которые фосфорилируют серины , которые инактивируют HDACs класса II .


Обсуждение

При химическом скрининге для регуляторов экспрессии MCIP1 , мы определили, что 5-HT2A/2B агонист собладает мощной гипертрофической деятельностью для сердечных мышечных клеток. Этот агонист, называется PAMH , стимулирует промотор гена MCIP1 и способствует гипертрофии миоцитов, по крайней мере частично , через кальцинеурин, что зависит от ядерного импорта NFAT и киназа -зависимого ядерного экспорта HDACs класса II.

Сигнализация PAMH через 5-HT2A/2B рецепторы .

Мы предполагаем, что PAMH и серотонин имеют частичный фармакофор (рис. 1б) , который направляет деятельность PAMH через 5 - HT2 рецепторы. По сравнению с серией PAMH аналогов, представляется, что конденсированное кольцо циклоалкила является критическим для биологической активности , и что замещение в пиридиновом кольце способствует прогипертрофической активности. Антагонист PAMH , A- PAMH , в котором отсутствуют конденсированное кольцо циклогексила и модификация PAMH метилированной боковой цепью, не может вызывать гипертрофию, хотя могутт связывать 5-НТ рецепторы ( данные не показаны). PAMH структурно связан с семейством молекул , которые обладают анксиолитической активностью (25), однако, не сообщалось о их потенциальном воздействии на мышечные клетки. Антигипертрофическая активность A- PAMH имеет потенциально серьезные последствия для блокады патологической гипертрофии сердца. В связи с этим, интересно отметить, что кетансерин, как было показано, уменьшает гипертрофию левого желудочка при сохранении сердечной функции у пациентов с артериальной гипертензией (26) , а также 5-НТ антагонист сарпогрелат ослабляет способность гипертрофических агонистов ангиотензина II и эндотелина- 1 стимулировать синтез белка в кардиомиоцитах (27). На основе эффектов 5 - HT2 антагонистов на прогипертрофическую деятельность PAMH, мы заключаем, что PAMH является селективным для 5-HT2A/2B рецепторов.

Влияние сигнализации рецептора 5 - НТ2В на сердечный рост и развития ( в обзоре . 24 ) .

Мыши, лишенные рецептора умирают от истощения миокарда (22) , а избыточная экспрессия рецептора во взрослых сердцах приводит к гипертрофии (23). Примечательно, что серотонин, который также связывает 5 - HT2 рецепторы, не способствовал гипертрофии кардиомиоцитов. Это несоответствие в действиях серотонина и PAMH можно объяснить тем, что серотонин неустойчив и быстро разлагается. Кроме того, он может активировать про-и анти- гипертрофические сигнальные пути, в то время как PAMH активирует только прогипертрофические пути. 5-HT2A/2B рецепторы также могут существовать в нескольких состояниях (для обзора см. кат. 28).

Путь сигнализации PAMH.

Подтипы рецепторов 5- HT2 ( 2А, 2В и 2С ) пара на Gαq/G11 и фосфолипазы С, которые вызывают высвобождение кальция внутриклеточного через инозиттрифосфат и последующую активацию PKC (рис. 6). Сильное ингибирование активности PAMH стауроспорином, но не ингибиторами PKC или других киназ, вовлеченных в гипертрофическую сигнализацию, предполагает, что кальций- зависимые киназы еще не были идентифицированы и могут опосредовать эффекты PAMH. Ингибиторы тирозинкиназы также подавляют PAMH действие. Несколько тирозинкиназ, в том числе SRC , JAK киназы и Erb -B, были вовлечены в передачу сигналов рецепторов 5-НТ (24). Роль тирозинкиназы и их потенциальные цели на пути PAMH сигнализации еще предстоит определить . mymio_logo.jpg



В отличии от полного подавления PAMH деятельности стауроспорином и ингибиторами тирозинкиназы , CSA ингибирует PAMH деятельность лишь частично . Таким образом, мы предполагаем, что PAMH действует прежде всего через киназа -зависимые пути расширенные для кальциневрина (рис. 6) . Кроме того , неполное ингибирование PAMH деятельности CSA может отражать потенцию, в которой PAMH активирует пути кальциневрина. В соответствии с идеей, что PAMH активирует сигнализацию кальциневрина, он стимулирует ядерный импорт NFAT и активацию NFAT MCIP1 промоутера. Тем не менее, мы также отмечаем, что MCIP1 белок повышается более резко , чем MCIP1 мРНК PAMH . Таким образом, хотя PAMH был определен на основе его способности стимулировать экзон 4 промотора MCIP1 кальциневрина, посттрансляционные механизмы могут также способствовать резкому увеличению MCIP1 белка в присутствии PAMH .

5- HT2 рецепторы активации кальциневрина в нейронах (29).

Точно так же, управление сигнальным путем серотонина у C. Элеганс путем активации кальциневринового пути (30), и трансгенная сверхэкспрессия MCIP1 имитирует фенотип с потерей функции кальцинейрина (31) , в соответствии с MCIP функционирует как репрессор сигнализации кальцинеурина. Хотя MCIP1 и CsA может подавлять гипертрофию из-за сигнализации кальцинеурина (18) , они могут не делать это в присутствии PAMH , потому параллельные пути , контролируемые PAMH - зависимых киназ обойти требование кальцинейрина .В дополнение к его влияние на NFAT ядерного импорта , способность PAMH содействовать ядерному экспорту HDAC5 и из сигнала устойчивостью HDAC5 мутанта блокировать гипертрофию в ответ на PAMH предполагает, что PAMH стимулирует активность в HDAC киназы , что инактивирует HDAC5. Вывод поддерживается полной блокадой PAMH деятельности после использования стауроспорина. Как мутантные HDACs подавляют активность PAMH еще предстоит определить , но мы выступаем за возможность того, что они взаимодействуют с усилителем фактора -2 миоцитов или других прогипертрофических транскрипционных факторов , таких как NFAT или GATA4 (32).

Последствия.

Биологическая активность PAMH предлагает интересные возможности для фармакологической модуляции роста мышц и функции. Помимо влияния на сердечный рост и развитие , передача сигналов рецептора 5 - НТ2В способствует выживанию миоцитов и биогенезу митохондрий (33). Недавние исследования также показали, глубокое стимулирующее действие PAMH на развитие скелета мышц (неопубликованные результаты) . Таким образом, путь PAMH сигнализации обеспечивает терапевтические возможности для манипулирования функциями поперечно-полосатых мышц при патологической гипертрофии , сердечной недостаточности, или расстройствах скелетных мышц.


Ссылки.

↵ Frey, N. & Olson, E. N. (2003) Annu. Rev. Physiol. 65 , 45-79. CrossRef Medline Web of Science

↵ MacLellan, W. R. & Schneider, M. D. (2000) Annu. Rev. Physiol. 62 , 289-319. CrossRef Medline Web of Science

↵ Olson, E. N. & Williams, R. S. (2000) Cell 101 , 689-692. CrossRef Medline Web of Science

↵ Kannel, W. B. & Cobb, J. (1992) Cardiology 81 , 291-298. Medline Web of Science mymio_logo.jpg

↵ Hogan, P. G., Chen, L., Nardone, J. & Rao, A. (2003) Genes Dev. 17 , 2205-2232. FREE Full Text

↵ McKinsey, T. A., Zhang, C. L. & Olson, E. N. (2002) Trends Biochem. Sci. 27 , 40-47. CrossRef Medline Web of Science

↵ Zhang, C. L., McKinsey, T. A., Chang, S., Antos, C. L., Hill, J. A. & Olson, E. N. (2002) Cell 110 , 479-488. CrossRef Medline Web of Science

↵ McKinsey, T. A., Zhang, C. L., Lu, J. & Olson, E. N. (2000) Nature 408 , 106-111. CrossRef

Medline

↵ Grozinger, C. M. & Schreiber, S. L. (2000) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97 , 7835-7840. Abstract/FREE Full Text

↵ Rothermel, B. A., Vega, R. B. & Williams, R. S. (2003) Trends Cardiovasc. Med. 13 , 15-21. CrossRef Medline Web of Science

↵ Kingsbury, T. J. & Cunningham, K. W. (2000) Genes Dev. 14 , 1595-1604. Abstract/FREE Full Text

↵ Rothermel, B., Vega, R. B., Yang, J., Wu, H., Bassel-Duby, R. & Williams, R. S. (2000) J. Biol. Chem. 275 , 8719-8725. Abstract/FREE Full Text

↵ Vega, R. B., Rothermel, B. A., Weinheimer, C. J., Kovacs, A., Naseem, R. H., Bassel-Duby, R., Williams, R. S. & Olson, E. N. (2003) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 100 , 669-674. Abstract/FREE Full Text

↵ Ryeom, S., Greenwald, R. J., Sharpe, A. H. & McKeon, F. (2003) Nat. Immunol. 4 , 874-881. CrossRef Medline Web of Science

↵ Yang, J., Rothermel, B., Vega, R. B., Frey, N., McKinsey, T. A., Olson, E. N., Bassel-Duby, R. & Williams, R. S. (2000) Circ. Res. 87 , E61-E68. Abstract/FREE Full Text

↵ Molkentin, J. D., Lu, J. R., Antos, C. L., Markham, B., Richardson, J., Robbins, J., Grant, S. R. & Olson, E. N. (1998) Cell 93 , 215-228. CrossRef Medline Web of Science

↵ Kimes, B. W. & Brandt, B. L. (1976) Exp. Cell Res. 98 , 367-381. CrossRef Medline Web of Science

↵ Rothermel, B. A., McKinsey, T. A., Vega, R. B., Nicol, R. L., Mammen, P., Yang, J., Antos, C. L., Shelton, J. M., Bassel-Duby, R., Olson, E. N., et al. (2001) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98 , 3328-3333. Abstract/FREE Full Text

↵ Hill, J. A., Rothermel, B., Yoo, K. D., Cabuay, B., Demetroulis, E., Weiss, R. M., Kutschke, W., Bassel-Duby, R. & Williams, R. S. (2002) J. Biol. Chem. 277 , 10251-10255. Abstract/FREE Full Text

↵ Genesca, L., Aubareda, A., Fuentes, J. J., Estivill, X., De La Luna, S. & Perez-Riba, M. (2003) Biochem. J. 374 , 567-575. CrossRef Medline Web of Science

↵ Wang, Y., De Keulenaer, G. W., Weinberg, E. O., Muangman, S., Gualberto, A., Landschulz, K. T., Turi, T. G., Thompson, J. F. & Lee, R. T. (2002) Am. J. Physiol. 283 , H533-H539.

↵ Nebigil, C. G., Choi, D. S., Dierich, A., Hickel, P., Le Meur, M., Messaddeq, N., Launay, J. M. & Maroteaux, L. (2000) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97 , 9508-9513. Abstract/FREE Full Text

↵ Nebigil, C. G., Jaffre, F., Messaddeq, N., Hickel, P., Monassier, L., Launay, J. M. & Maroteaux, L. (2003) Circulation 107 , 3223-3229. CrossRef Medline Web of Science

↵ Nebigil, C. G. & Maroteaux, L. (2003) Circulation 108 , 902-908. CrossRef Medline Web of Science

↵ Thompson, M., Forbes, I. T. & Johnson, C. N. (1992) U. S. Patent 5,093,493.

↵ Cobo, C., Alcocer, L. & Chavez, A. (1990) Cardiovasc. Drugs Ther. 4 , 73-36.

↵ Ikeda, K., Tojo, K., Tokudome, G., Hosoya, T., Harada, M. & Nakao, K. (2000) Life Sci. 67 , 2991-2996. CrossRef Medline Web of Science

↵ Strange, P. G. (1999) Biochem. Pharmacol. 58 , 1081-1088. CrossRef Medline Web of Science

↵ Day, M., Olson, P. A., Platzer, J., Striessnig, J. & Surmeier, D. J. (2002) J. Neurophysiol. 87 , 2490-2504. Abstract/FREE Full Text

↵ Lee, M. H., Han, S. M., Han, J. W., Kim, Y. M., Ahnn, J. & Koo, H. S. (2003) FEBS Lett. 555 , 250-256. CrossRef Medline

↵ Bandyopadhyay, J., Lee, J., Lee, J. I., Yu, J. R., Jee, C., Cho, J. H., Jung, S., Lee, M. H., Zannoni, S., Singson, A., et al. (2002) Mol. Biol. Cell 13 , 3281-3293. Abstract/FREE Full Text

↵ Suzuki, Y. J., Day, R. M., Tan, C. C., Sandven, T. H., Liang, Q., Molkentin, J. D. & Fanburg, B. L. (2003) J. Biol. Chem. 278 , 17525-17531. Abstract/FREE Full Text

↵ Nebigil, C. G., Etienne, N., Messaddeq, N. & Maroteaux, L. (2003) FASEB J. 17 , 1373-1375. Abstract/FREE Full Text
Переведено проектом МОЙМИО: www.mymio.org

Оригинал статьи: http://www.pnas.org/content/101/9/2870.long



mymio_logo.jpg


База данных защищена авторским правом ©uverenniy.ru 2016
обратиться к администрации

    Главная страница