Инструкция по применению набора сорбентов для оценки гемостаза в гепаринизированной плазме крови




Скачать 38.53 Kb.
Дата08.07.2016
Размер38.53 Kb.

ТОЛЬКО ДЛЯ IN VITRO ДИАГНОСТИКИ



ИНСТРУКЦИЯ

по применению набора сорбентов для оценки гемостаза

в гепаринизированной плазме крови

Гепасорб

НАЗНАЧЕНИЕ


Набор Гепасорб предназначен для проведения сорбции гепарина из плазмы крови больных, получающих этот антикоагулянт, с последующим определением в обработанной плазме крови активированного парциального тромбопластинового времени (АПТВ/АЧТВ), протромбинового (ПВ) и тромбинового (ТВ) времени свертывания. Применение сорбентов гепарина позволяет определять фоновые (без влияния гепарина) показатели коагулограммы, а также дифференцировать при ДВС-синдроме причины кровотечений (при выявленной гипокоагуляции в тестах) - связанной и не связанной с приемом гепарина.

ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА


Принцип метода. Принцип метода основан на способности сорбентов связывать в плазме крови гепарин путем образования нерастворимого комплекса «сорбент-гепарин», который удаляется последующим центрифугированием.

Сорбент Гепасорб-1 используется для удаления гепарина из плазмы крови только при определении ТВ.

Сорбент Гепасорб-2 применяется для удаления гепарина из плазмы крови только при оценке АПТВ и ПВ.

Состав набора:

1. Сорбент Гепасорб-1, 1,0 г - 1 фл.

2. Сорбент Гепасорб-2, 2,0 г - 1 фл.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА

Пригодность сорбентов, входящих в состав набора, оценивается по их способности связывать гепарин в концентрации 5,0 ед/мл в пулированной свежей или лиофилизированной плазме крови с аттестованным значением в нормальной области по АПТВ, ПВ и ТВ.

Исследование крови на фоне лечения непрямыми антикоагулянтами, дезагрегантами и фибринолитиками не влияет на приведенную выше способность сорбента связывать гепарин.

В плазме крови, содержащей гепарин (5,0 ед/мл), отмечается отсутствие свертывания по АПТВ в течение 300 с, по ПВ - в течение 40 с и ТВ - в течение 120 с. В сорбированной свежей цитратной плазме крови определяются неизмененные, по сравнению с аттестованными значениями, показатели свертывания по АПТВ, ПВ и ТВ. В сорбированной лиофилизированной плазме крови определяются показатели по АПТВ в диапазоне 40-55 с, по ПВ - 14-20 с, по ТВ - 16-20 с.


МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ


Все реагенты, входящие в набор, используются только для применения in vitro.

Все компоненты набора в используемых концентрациях не токсичны.

При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы плазмы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита В или любой другой возбудитель вирусной инфекции.

ОБОРУДОВАНИЕ, МАТЕРИАЛЫ, РЕАГЕНТЫ


Центрифуга лабораторная;

Секундомер; весы торсионные;

Пипетки вместимостью 1,0 мл; пробирки стеклянные;

Перчатки резиновые хирургические.


ПРИГОТОВЛЕНИЕ АНАЛИЗИРУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ


Кровь для исследования забирают из локтевой вены в пластиковую или силиконированную пробирку, содержащую 3,8% раствор натрия лимоннокислого 3-х замещенного (цитрата натрия), соотношение объемов крови и цитрата натрия - 9:1. Кровь центрифугируют при 3000-4000 об/мин (1200 g) в течение 15 мин. В результате получают бедную тромбоцитами плазму, которую переносят в другую пробирку, где хранят до проведения исследования.

Центрифугирование должно проводиться непосредственно после взятия крови, а отбор плазмы на исследование - сразу же после центрифугирования. Не допускается анализ плазмы, имеющей сгустки, гемолиз, избыток цитрата натрия и полученной более 2 ч назад, а также замороженной плазмы крови.


ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ И ПРОВЕДЕНИЕ
СОРБЦИИ ГЕПАРИНА


В пробирку внести 10 мг сорбента Гепасорб-1 и 1,0 мл исследуемой плазмы крови. Постоянно встряхивая, перемешать плазму с сорбентом при комнатной температуре (+18...+25оС) в течение 8 мин, исключая образование пены и осадка на дне пробирки. Затем смесь центрифугировать при 1000-1500 об/мин (120 g) в течение 2 мин. Надосадочную жидкость осторожно перенести с помощью пипетки в другую пробирку. Плазму крови после сорбции можно использовать для оценки ТВ в течение 1 ч в условиях хранения при комнатной температуре.

Сорбцию гепарина из плазмы крови сорбентом Гепасорб-2 производить по приведенной выше методике. Расход сорбента - 20 мг на 1,0 мл плазмы крови. Полученную плазму использовать при аналогичных условиях хранения для оценки АПТВ и ПВ.


УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ


Набор рассчитан на проведение сорбции гепарина каждым из сорбентов в 100 мл плазмы. Расход реагентов на 1 мл плазмы: 10 мг реактива Гепасорб-1 или 20 мг реактива Гепасорб-2.

Хранение набора должно проводиться при температуре +2-8оС в течение всего срока годности набора (24 мес). Допускается хранение набора при температуре до +25оС в течение 10 сут. Замораживание не допускается.

Сорбенты Гепасорб-1 и Гепасорб-2 можно хранить после начала их использования в течение 12 мес. при температуре +2-8оС при условии достаточной герметизации флаконов.

Дополнительные возможности
при использовании сорбентов гепарина


Применение сорбентов позволяет также определить базовые показатели концентрации фибриногена (по Рутберг) и активности антитромбина III (по Abildgaard) в плазме крови больных, получающих гепаринотерапию.

1) При оценке активности антитромбина III применить Гепасорб-1.

2) При определении концентрации фибриногена использовать Гепасорб-2.

Сорбцию гепарина из плазмы провести по методике, приведенной выше.


ЛИТЕРАТУРА:

1. Момот А.П., Соколов Э.А., Цеймах И.Я. Значение элиминации из плазмы гепарина для оценки коагулограммы и активности антитромбина III //Клинич. лаб. диагностика. - 1995. - N 5. - С. 31-34.



2. Баркаган З.С., Момот А.П. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза. - М.: "Ньюдиамед-АО", 2001. - 296 с.


База данных защищена авторским правом ©uverenniy.ru 2016
обратиться к администрации

    Главная страница