Эпигаллокатехин egcg лечебные эффекты Кожные болезни Сахарный диабет Ожирение Научные исследования Укрепления здоровья эффекты зеленого чая




страница39/76
Дата14.08.2016
Размер2.87 Mb.
1   ...   35   36   37   38   39   40   41   42   ...   76

Inhibition of herpes simplex virus type 1 with the modified green tea polyphenol palmitoyl-epigallocatechin gallate.


de Oliveira A1, Adams SD, Lee LH, Murray SR, Hsu SD, Hammond JR, Dickinson D, Chen P, Chu TC.

Author information


  • 1Department of Biological Science, Seton Hall University, South Orange, NJ 07079, USA.

Abstract


Green tea polyphenol epigallocatechin gallate (EGCG) is a strong antioxidant that has previously been shown to reduce the number of plaques in HIV-infected cultured cells. Modified EGCG, palmitoyl-EGCG (p-EGCG), is of interest as a topical antiviral agent for herpes simplex virus (HSV-1) infections. This study evaluated the effect of p-EGCG on HSV-infected Vero cells. Results of cell viability and cell proliferation assays indicate that p-EGCG is not toxic to cultured Vero cells and show that modification of the green tea polyphenol epigallocatechin gallate (EGCG) with palmitate increases the effectiveness of EGCG as an antiviral agent. Furthermore, p-EGCG is a more potent inhibitor of herpes simplex virus 1 (HSV-1) than EGCG and can be topically applied to skin, one of the primary tissues infected by HSV. Viral binding assay, plaque forming assay, PCR, real-time PCR, and fluorescence microscopy were used to demonstrate that p-EGCG concentrations of 50 μM and higher block the production of infectious HSV-1 particles. p-EGCG was found to inhibit HSV-1 adsorption to Vero cells. Thus, p-EGCG may provide a novel treatment for HSV-1 infections.

Обсуждение


Хотя с инфекцией ВПГ-1 или -2, как правило, бессимптомно, вирусной активации результаты в эпителиальных поражений, которые являются болезненными, повторяющийся, язвенные и инфекционные. ВПГ-1 вызывает герпес и поражения полости рта и губ, а также герпеса кератит, ведущей причиной роговичной слепоты в Соединенных Штатах. ВПГ-1 также становится индуктором генитальный герпес в развивающихся странах (Xu et al. 2006), хотя HSV-2 является основной причиной большинства случаев генитального герпеса. В редких случаях, ВПГ-2 также может вызвать энцефалит (Stanberry et al. 2000; Xu et al. 2006). Частые вспышки ВПГ может иметь серьезные психологические и социальные последствия инфицированных лиц. Далее, HSV поражений предоставить facile маршрут на ВИЧ-инфекцию во время сексуальной активности (Van de Perre et al. 2008; Wald и ссылку, 2002). ВПГ-1 и -2 окутаны, двуцепочечной ДНК вирусов с ~152 Кб геномы и capsids ~200 нм в диаметре (Garner 2003). Вирион состоит из трех основных структур, наружная часть называется " конверт", который включает в себя 11 гликопротеины, интегумента слой, состоящий из 15 белков, и капсид икосаэдрической включения вирусной ДНК (Foster et al. 1998 г.; Гарнер 2003; Уиллард 2002). Кожи, соединить белки капсида к вирусной оболочки.

ВПГ-инфекция, инициированных конверт гликопротеин C связывания с клеточной поверхностью протеогликана гепарин-сульфата на эпителиальных клеток и гликопротеин D привязки к одной из трех вступления рецепторов; это приводит к сильной вириона крепления для клетки-хозяина (Ахтар и Шукла 2009; Carfi et al. 2001; Шукла и копье, 2001; Spear et al. 2006). Гликопротеины B, D, H и L образуют комплекс, который приводит слияние вирусной оболочки с мембраной клетки-хозяина, позволяя вирусу проникнуть внутрь клетки. Вирусный капсид транспортируется в ядро, где вирусная ДНК содержимое высвобождается. Постоянные пожизненная инфекция сохраняется вирус, заражающий и становится скрытой в клеточных тел нейронов. Активации (например, при других вирусных инфекций, стресса или травмы) и аксонального транспорта может привести к реинфекции эпителиальных клеток и рецидивов поражения.

Хотя много усилий было приложено, в настоящее время не существует эффективной вакцины против ВПГ-инфекции, которая успешно уклоняется от иммунной системы при латентной инфекции (Belshe et al. 2012; Бернштейн и Stanberry 1999; Toka et al. 2004). Нуклеотидные аналоги таргетинга репликации вируса представляют собой первичное лечение для инфекции, но они не обеспечивают излечения (Brady и Бернштейн 2004; Fatahzadeh и Шварц 2007; морфин и Thouvenot 2003). Кроме того, вирус может выработать резистентность из-за мутации в ДНК ген полимеразы (Brady и Бернштейн 2004; Frobert et al. 2008 г.; Lebel и Boivin 2006; Пирет и Boivin 2011). Поэтому новые лекарства, необходимые для блокирования инфекции и профилактики вирусных линьке одним зараженным индивидом (морфин и Thouvenot 2003). EGCG сообщалось отсутствия помечено в цитотоксические эффекты на незлокачественные клетки (Бабич et al. 2005; Weisburg et al. 2004). Представленные здесь данные показывают, что оба EGCG и p-EGCG имеют схожие цитотоксичность по отношению почки Африканской зеленой мартышки-производные клетки Vero в концентрации до 75 мкм. Экспериментальные исследования с 100 мкм ЭГКГ и p-EGCG показали никакого увеличения токсичности. Клеточный метаболизм, сохраняет 90% его нормальной деятельности, предполагая, что EGCG и p-EGCG не являются токсичными в концентрациях, используемых в данном исследовании. EGCG неустойчив в водном растворе и легко окисляется, что приводит к потере активности (Chen et al. 2009; Chen et al. 2003). Таким образом, водный актуальные решения должны быть подготовлены пресной, сделав ее непригодной для приготовления лекарств. Несколько экспериментальных подходов, используемых здесь, показали, что пальмитоил-EGCG, и в меньшей степени EGCG, было мощное ингибирующее действие на ВПГ-1 литический цикл, в соответствии с предыдущим отчетом за эффекты EGCG (Isaacs et al. 2008). Лечение вирионов в течение 1 часа с 50 мкм EGCG и p-EGCG и удаляется через 1 час поглощение вызвало 92%, >99%, соответственно, снижение инфекционности, как измеряется образования налета. В отличие от эффекта p-EGCG на метаболизм клеток Vero, влияние на ВПГ-1 был дозозависимым (рис. 8). Кроме того, p-EGCG лечение вызвало >99% снижение количества HSV-1 геном ДНК, синтезированных 12 часов после инфицирования, в то время как EGCG вызвало 95% снижения.

В данном исследовании EGCG или p-EGCG был удален после того, как один час вирусной адсорбции, но все-таки привело к значительному ингибированию вирусной производство на клетки Vero. Одним из потенциальных механизмов для этого ингибиторный эффект EGCG и p-EGCG на ВПГ-1 литический цикл, блокируя вириона вступления в клетки, в которых наблюдалось влияние EGCG на ВИЧ и инфекции вируса гриппа (Song et al. 2005; Williamson et al. 2006). В качестве альтернативы (или в дополнение), вирион частиц может быть поврежден, как было отмечено ранее, для влияние EGCG на ВПГ (Isaacs et al. 2008). Хотя эти могут быть доминирующий механизм(ы), некоторые ДНК ВПГ-1 сохраняется после инфекции клеток Vero с EGCG или p-EGCG очищенных вирионов, выступающей в качестве эффективной ПЦР шаблоны для HSV-1 генов, предполагая некоторые вирусной частицы проникать в клетки и геном реплицируется хотя не обнаруживаются бляшки образуются. Следовательно, p-EGCG может также влиять на внутриклеточные генома людьми и/или сборки вириона, чтобы сформировать жизнеспособные вирусные частицы. Дальнейшая работа будет необходим для проверки этих возможностей и дальнейшего уточнения механизмов действия. В совокупности, результаты этого исследования показывают, что липофильные р-EGCG является мощным ингибитором ВПГ-1-инфекции эпителиальных клеток in vitro в нетоксичных дозах. Жирные кислоты производные устойчив к воздействия воздуха, рН влагалища (Isaacs et al. 2008; Lambert et al. 2006 г.; пел et al. 2005; Zhu et al. 1997), и является более эффективное противовирусное средство против HSV-1, чем EGCG. Palmitoyl-EGCG поэтому предлагает потенциально полезный подход, чтобы предотвратить заражение нанесение на эпителиальных тканях. Исследование было недавно сообщили, что местное применение липофильных EGCG может быть потенциальным эффективным средством для лечения ВПГ (Zhao et al. 2012). Использование p-EGCG может иметь значительные выгоды для здоровья населения и требует дальнейшего изучения в соответствующих моделях.


1   ...   35   36   37   38   39   40   41   42   ...   76


База данных защищена авторским правом ©uverenniy.ru 2016
обратиться к администрации

    Главная страница