Эпигаллокатехин egcg лечебные эффекты Кожные болезни Сахарный диабет Ожирение Научные исследования Укрепления здоровья эффекты зеленого чая


Preventive effects of epigallocatechin-3-O-gallate against replicative senescence associated with p53 acetylation in human dermal fibroblasts



страница38/76
Дата14.08.2016
Размер2.87 Mb.
1   ...   34   35   36   37   38   39   40   41   ...   76

Preventive effects of epigallocatechin-3-O-gallate against replicative senescence associated with p53 acetylation in human dermal fibroblasts.


Han DW1, Lee MH, Kim B, Lee JJ, Hyon SH, Park JC.

Author information


  • 1Department of Applied Nanoscience and BK 21 Nano Fusion Technology Division, College of Nanoscience & Nanotechnology, Pusan National University, Busan, Republic of Korea. nanohan@pusan.ac.kr

Abstract


Considering the various pharmacological activities of epigallocatechin-3-O-gallate (EGCG) including anticancer, and anti-inflammatory, antidiabetic, and so forth, relatively less attention has been paid to the antiaging effect of EGCG on primary cells. In this study, the preventive effects of EGCG against serial passage-induced senescence were investigated in primary cells including rat vascular smooth muscle cells (RVSMCs), human dermal fibroblasts (HDFs), and human articular chondrocytes (HACs). The involvement of Sirt1 and acetylated p53 was examined as an underlying mechanism for the senescence preventive activity of EGCG in HDFs. All cells were employed with the initial passage number (PN) between 3 and 7. For inducing senescence, the cells were serially passaged at the predetermined times and intervals in the absence or presence of EGCG (50 or 100 μM). Serial passage-induced senescence in RVSMCs and HACs was able to be significantly prevented at 50 μM EGCG, while in HDFs, 100 μM EGCG could significantly prevent senescence and recover their cell cycle progression close to the normal level. Furthermore, EGCG was found to prevent serial passage- and H(2)O(2)-induced senescence in HDFs by suppressing p53 acetylation, but the Sirt1 activity was unaffected. In addition, proliferating HDFs showed similar cellular uptake of FITC-conjugated EGCG into the cytoplasm with their senescent counterparts but different nuclear translocation of it from them, which would partly account for the differential responses to EGCG in proliferating versus senescent cells. Taking these results into consideration, it is suggested that EGCG may be exploited to craft strategies for the development of an antiaging or age-delaying agent.

1. Введение


Клеточное старение означает состояние необратимого роста ареста на которых нормальные клетки теряют способность к делению, как правило, приблизительно после 50 делений клетки in vitro [1]. Некоторые стареющие клетки становятся меньше после циклов репликации в результате DNA double-strand breaks. Этот феномен, известный также как репликативного старения, было впервые сообщено Хейфлик и Мурхед отметив, что нормальные человеческие фибробласты были в состоянии войти в состояние необратимого роста после ареста серийного разведения in vitro; между тем раковые клетки не ввести этот рост ареста государства и распространение на неопределенный срок [1]. Клеточное старение может быть вызвано несколькими механизмами, в том числе укорочение теломер, эпигенетических derepression циклин-зависимой киназы (CDK) ингибитор 2А локус, и повреждения ДНК [2]. Более того, эти механизмы ограничивают чрезмерное или аберрантных клеточную пролиферацию, и поэтому государство старения защищает от развития рака и участвует в процессе старения [2]. В течение последнего десятилетия, многие факты свидетельствуют о том, что ресвератрол, полифенол, найденные в красном вине, оказывает ограничение калорийности миметической деятельности с потенциальным antiaging имущества путем активации silent information regulator (сэр) генов (сиртуинов) или ингибирования лагерь-унижающее фосфодиэстеразы [3-6].

С этой точки зрения, наше внимание было уделено epigallocatechin3-O-галлат (EGCG), так как оно имеет очень похожую структуру, что ресвератрол в том числе гидроксильной группы в двух metapositions в кольцо, транс B кольцо с 4' или 3', 4' гидроксила pattern [6]. EGCG, наиболее активный и важный компонент полифенолов в зеленом чае, хорошо известно, что основной составляющей потенциальные преимущества зеленого чая для здоровья человека [7-9]. Но роль EGCG в этиологии и лечении связанных со старением заболеваний, включая нейродегенеративные, канцерогенез, атеросклероз и ожирение-это вряд ли окончательный, и некоторые до сих пор оспаривается самой природе его механизм действия в организме [10, 11]. Хотя механизм действия оспариваемого некоторых следователей, остается четкое распознавание на основе многих in vitro, in vivo и эпидемиологические исследования, о том, что EGCG обладает полезными для здоровья эффектов [12, 13]. Основное действие механизмов EGCG были предложены как участвующие в его мощной антиоксидантной активностью, что позволяет нейропротекция и кардиопротекция [14, 15]. Другие механизмы благоприятствования повлечь за собой химические, противовоспалительное, антитромботическое, и даже цитопротективные эффекты EGCG [16-18]. В настоящей работе мы исследовали профилактическое воздействие EGCG против последовательный проход - и H2O2-индуцированного старения в первичных элементов. Как потенциальный механизм старения профилактической активности EGCG, мы определили вовлечение Sirt1 и ацетилированного экспрессия р53. Кроме того, мы рассматривали дифференциальные ответы EGCG в пролиферирующих против стареющих первичных элементов путем сравнения ЕГРЮЛ образец EGCG, конъюгированных с флуоресцина-4-isothiocyanate (FITC) в пролиферирующих фибробластов, что в их старых аналогов.


1. Introduction


Cellular senescence means a state of irreversible growth arrest by which normal cells lose the ability to divide generally after about 50 cell divisions in vitro [1]. Some cells become senescent after fewer replication cycles as a result of DNA double-strand breaks. This phenomenon, also known as replicative senescence, was first reported by Hayflick and Moorhead observing that normal human fibroblasts were able to enter a state of irreversible growth arrest after serial cultivation in vitro; meanwhile cancer cells did not enter this growth arrest state and proliferated indefinitely [1]. Cellular senescence can be triggered by multiple mechanisms including telomere shortening, the epigenetic derepression of the cyclin-dependent kinase (CDK) inhibitor 2A locus, and DNA damage [2]. Moreover, these mechanisms limit excessive or aberrant cellular proliferation, and so the state of senescence protects against the development of cancer and is involved in aging [2]. During the last decade, much evidence suggests that resveratrol, a polyphenol found in red wine, exerts a calorie restriction mimetic activity with a potential antiaging property by activating silent information regulator (SIR) genes (sirtuins) or inhibiting cAMP-degrading phosphodiesterases [36].

From this point of view, our attention has been paid to epigallocatechin3-O-gallate (EGCG), since it has a very similar structure to that of resveratrol including hydroxyls in the two metapositions of the A ring, trans to the B ring with a 4′ or 3′, 4′ hydroxyl pattern [6]. EGCG, the most active and major component of polyphenols in green tea, is well known to be a primary contributor to the potential benefits of green tea to human health [79]. But the role of EGCG in the etiology and treatment of aging-related diseases, including neurodegeneration, carcinogenesis, atherosclerosis and obesity is hardly definitive, and some have still challenged the very nature of its action mechanism within the body [10, 11]. Although the mechanism of action is disputed by certain investigators, there remains a clear recognition based on many in vitro, in vivo, and epidemiologic studies suggesting that EGCG possesses beneficial health effects [12, 13]. The main action mechanisms of EGCG have been suggested as being involved in its potent antioxidant activity, which allows neuroprotection and cardioprotection [14, 15]. Other favored mechanisms entail chemopreventive, anti-inflammatory, antithrombotic, and even cytoprotective effects of EGCG [1618]. In the present study, we investigated the preventive effects of EGCG against serial passage- and H2O2-induced senescence in primary cells. As a potential mechanism for this senescence preventive activity of EGCG, we determined the involvement of Sirt1 and acetylated p53 expression. In addition, we examined differential responses to EGCG in proliferating versus senescent primary cells by comparing the incorporation pattern of EGCG conjugated with fluorescein-4-isothiocyanate (FITC) in proliferating fibroblasts with that in their senescent counterparts.



Ингибирование вируса простого герпеса типа 1 с измененным полифенол зеленого чая-пальмитоил -эпигаллокатехин галлат.

Зеленого чая полифенол эпигаллокатехин галлат (EGCG) является сильным антиоксидантом, что ранее было показано, чтобы уменьшить количество бляшек в ВИЧ-инфицированной культуре клеток. Модифицированные EGCG, пальмитоил-EGCG (p-EGCG), представляет интерес как актуальное противовирусное средство для вируса простого герпеса (HSV-1) инфекций. В этом исследовании оценивали эффект p-EGCG на ВПГ-инфицированных клеток Vero. Результаты жизнеспособность клеток и пролиферации клеток анализов указывают на то, что p-EGCG не токсичен для культивируемых клеток Vero и показывают, что модификация зеленого чая полифенол эпигаллокатехин галлат (EGCG) с пальмитат повышает эффективность EGCG в качестве противовирусного агента. Кроме того, p-EGCG является более мощным ингибитором вируса простого герпеса 1 (HSV-1), чем EGCG и может быть наружно применяется для кожи, одной из основных тканей, инфицированных ВПГ. Вирусный binding assay, образуя налет анализа, ПЦР, ПЦР в реальном времени, и флуоресцентной микроскопии было показано, что p-EGCG концентрации 50 мкм и выше блок производства инфекционных HSV-1 частиц. p-EGCG было обнаружено, ингибируют HSV-1 адсорбции клеток Vero. Таким образом, p-EGCG может обеспечить романе лечение ВПГ-1 инфекции.



Food Chem Toxicol. 2013 Feb;52:207-15. doi: 10.1016/j.fct.2012.11.006. Epub 2012 Nov 23.



Поделитесь с Вашими друзьями:
1   ...   34   35   36   37   38   39   40   41   ...   76


База данных защищена авторским правом ©uverenniy.ru 2019
обратиться к администрации

    Главная страница