Алт / гпт эрба cистемный Реагент ifcc метод, без пиридоксаль-5-фосфата Применение




Скачать 67.82 Kb.
Дата06.06.2016
Размер67.82 Kb.






АЛТ / ГПТ

ЭРБА Cистемный Реагент

IFCC метод, без пиридоксаль-5-фосфата
Применение

Реагент предназначен для in vitro диагностики АЛТ в сыворотке.


Клиническое значение

АЛТ присутствует в высокой концентрации в печени, в низкой концентрации в почках, сердечной и скелетной ткани мышц, поджелудочной железе, селезенке и легких.

Повышение уровня АЛТ является результатом первичных болезней печени, таких как цирроз печени, карцинома, вирусный или токсический гепатит, обструкционная желтуха.

Снижение уровня АЛТ наблюдается у пациентов, повергающихся почечному диализу и у пациентов с недостатком витамина В6.


Метод

В соответствии с рекомендациями (IFCC) Международной Федерации Клинической Химии, без пиридоксаль-5-фосфата


Принцип реакции
АЛТ/SGPT

L-Аланин + 2-Оксоглутарат Пируват + L-Глутамат


ЛДГ

Пируват + НАДН L-Лактат + НАД+


АЛТ : Аланинаминотрансфераза

ЛДГ : Лактатдегидрогеназа


Активность АЛТ в пробе пропорциональна изменению поглощения при 340нм.
Состав реагентов

R1

Трис буфер (pH 7.5) 100 ммоль/л

L - Аланин 440 ммоль/л

ЛДГ ≥ 4000 Е/л

2-Оксоглутарат 13.21 ммоль/л

R2

НАДН 1,66 ммоль/л



Меры предосторожности

Набор реагентов предназначен для in vitro диагностики профессионально обученным лаборантом.


Первая помощь

При приеме внутрь следует прополоскать рот водой, выпить 0,5 л воды и вызвать рвоту. При попадании в глаза быстро промыть их проточной водой. При попадании на кожу необходимо промыть теплой водой с мылом. Во всех серьезных случаях обратиться к врачу.


Приготовление рабочих реагентов

Реагенты (R1 и R2) готовы к использованию.



Для ручного метода исследования:

Смешать 4 части раствора реагента 1 (R1) с 1 частью раствора реагента 2 (R2), тщательно перемешать.


Хранение и стабильность

Не вскрытые реагенты (R1 и R2) стабильны до достижения указанного срока годности, если хранятся при 2-8°C. Рабочий реагент (4R1 : 1R2) стабилен 30 дней при 2-8°C, при хранении в защищенном от света месте, избегая контаминации.

Перед работой рекомендуется проверить реагенты на пригодность.
Определение не пригодности реагента

- Замутнение

- Проверить попадание значений контролей в допустимый интервал

- Поглощение рабочего реагента < 0.8 при 340 нм


Образцы

Не гемолизированная сыворотка или гепаринизированная плазма. В качестве антикоагулянта можно использовать гепарин и ЭДТА. Стабильность АЛТ в образце 3 дня при 2-8°C. Рекомендуется работать со свежеприготовленными образцами.


Дополнительные материалы необходимые для работы





Параметры для проведения анализа на полуавтоматическом анализаторе


Метод

Кинетика

Длина волны1 (нм)

340

Объем образца (мкл)

50/100

Объем реагента (мкл)

500/1000

Задержка ( Сек.)

60

Интервал измерения ( Сек. )

60

Кол-во замеров

1

Фактор

1746

Температура реации(°C )

37

Направление реакции

Уменьшение

Нижний предел нормы (Е/л)

0

Верхний предел нормы (Е/л)

37

Нижний предел линейности (Е/л)

0

Верхний предел линейности (Е/л)

240

Мин. Начальное поглощение

0.8

Бланк

Вода

Единицы

IU/L(Е/л)

Протоколы для использования на автоматических анализаторах могут быть получены по запросу.
Проведение анализа


Пипетирование

Тест

Рабочий реагент

1000мкл

Образец

100мкл

Тщательно смешать, аспирировать
Расчеты

АЛТ/ ГПТ Активность(Е/л) = A/мин х Фактор(1746) (37°C)
Протоколы для работы на автоматических биохимических анализаторах серии XL «Эрба Лахема с.р.о.», Чешская Республика могут быть получены по запросу.
Калибровка

Мы рекомендуем для калибровки автоматического анализатора использовать XL МультиКалибратор и Лионорм Калибратор, Кат.№ 10003200.


Коэффициент пересчета

Е/л х 0,017 = мккат/л


Контроль качества

Для проведения контроля качества рекомендуются контрольные сыворотки: Лионорм ГУМ Н, Кат.№10003204, Лионорм ГУМ П, Кат.№10003206


Специфичность / Влияющие вещества

Гемоглобин до 150 мг/дл, аскорбиновая кислота до 30 мг/дл, билирубин до 40 мг/дл и триглицериды до 1000 мг/дл не влияют на результаты анализа.


Нормальные величины

Сыворотка / Плазма

Женщины до 32 Е/л (0,54 мккат/л)

Мужчины до 42 Е/л (0,71 мккат/л)


Приведенные диапазоны величин следует рассматривать как ориентировочные. Каждой лаборатории необходимо определять свои диапазоны.
Воспроизводимость


Внутрисерийная


N

Среднеарифметическое значение (Е/л)

SD Е/л

CV ( % )

Уровень – 1

20

61.32

0.84

1.37

Уровень– 2

20

118.80

0.90

0.76




Межсерийная


N

Среднеарифметическое значение (Е/л)

SD Е/л

CV ( % )

Уровень– 1

20

45.0

1.02

2.23

Уровень – 2

20

145.2

3.42

2.361


Сравнение методов

Сравнение было проведено на 40 образцах с использованием ЭРБА реагентов АЛТ (у) и имеющихся в продаже реагентов с коммерчески доступной методикой (х).

Результаты:

y = 0.997x – 0.081 Е/л

r = 0.997 (r – коэффициент корреляции)
Линейность

Реакция линейна до 300 Е/л (5,1 мккат/л)


Нижний предел определения

8,4 Е/л (0,143 мккат/л)


Утилизация использованных материалов

В соответствии с существующими в каждой стране правилами для данного вида материала


Фасовка

Кат.№

АЛТ/SGРT Реагент -1

АЛТ/SGРT Реагент - 2

XSYS017

6 x 44 мл

3 x 22 мл


Литература

1. Zilva, J.F. Pannall, P.R. “Plasma Enzymes in Diagnosis” in Cli­nical Chemistry in Diagnosis and Treatment. Lloyd-Luke London. 1979; Chap 17 : 338.

2. Wroblewski, F. LaDue, J.S. Proc. Sec. Exp. Biol. and Med. 1956; 34 : 381.

3. Henry, R.J. et al. Am. Jnl. Clin. Path. 1960; 34 : 381.

4. Bergmeyer, H.U. et al. Clin. Chem. 1978; 24 : 58-73.

5. IFCC Expert Panel on enzymes Part 3. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1986; 24 : 481-95.

6. Murray RL. “Alanine aminotransferase” in Clinical Chemistry. Theory, analysis and correlation. Kaplan LA. Pesce, A.J. (Eds), CV Mosby St Louis 1984; 1090.

7. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. Burtis CA and Ashwood ER (Eds). Second Edition, WB Saunders Company, 1994.

8. Young, D.S. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests.Third Edition. 1990 : 3 : 6-12.

9. Wachtel, M. et al, Creation and Verification of Reference Inter­vals. Laboratory Medicine 1995; 26 : 593-7.

10. National Committee for Clinical Laboratory Standards. User evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices. NCCLS Publication EP5-T.




Представительство Erba Lachema в Российской Федерации


109029 г.Москва, ул.Нижегородская 32, корп.15, офис503

тел. +7 (495) 961 45 22, e-mail: lachema@mail.ru, www.lachema.ru







База данных защищена авторским правом ©uverenniy.ru 2016
обратиться к администрации

    Главная страница